【新冠病毒快速诊断】Abbott|基于NEAR技术的COVID-19快速诊断
2020-03-31   阅读:495   来源:生物通

据悉,雅培(Abbott)ID NOW分子诊断平台已经收到美国FDA的紧急使用授权(EUA),用于COVID-19诊断。厂家现已加大生产力度,从下周开始将每天向美国医疗系统提供5万次检测,预计4月份将生产500万个测试,以便帮助筛查感染人群。

ID NOW分子诊断平台技术上基于切口内切酶扩增反应(nicking endonuclease amplification reaction,NEAR)技术,提供超快速DNA或RNA扩增,与荧光检测结合,能在13分钟或更短的时间内得到细菌或病毒检测结果(5分钟内得出阳性结果,15分钟内确定阴性结果)。

ID NOW™ COVID-19靶向冠状病毒SARS-COV-2的RdRp基因。用自制的临床鼻咽拭子评价ID NOW™ COVID-19的性能。样本是纯化的患者标本病毒RNA制作的鼻咽拭子,浓度约为2倍和5倍的SARS-CoV-2基因组。

工作原理

当检测目标为冠状病毒RNA时,其驱动力是两条模板(类似引物)和三种酶(耐热DNA聚合酶、逆转录酶和耐热缺口核酸内切酶),提供短扩增子的指数扩增,短时间内完成检测。

如图所示A(1a)T2的识别区与互补靶区结合A(2a)聚合酶沿靶区延伸A(3a)第二个T2与同一目标结合并延伸,取代第一个T2A(4a)T1的识别区与释放链中的互补链结合并延伸至5′端,形成双链缺口酶识别位点A(5a)缺口酶结合并剪切(用剪刀表示)A(6a)聚合酶沿着T1合成被切割的3′OH,取代剩余的靶互补链,最后延伸的双链复合物称为NEAR扩增双链B(1a)缺口酶与两个识别位点结合B(2a)两个位点的裂解和链位移产生两个复合物,每个复合物由一个双稳定区、一个缺口酶识别区和一个单链靶标组成B(3a)重复切割、聚合和链置换,裂解聚合物被再生B(4a)产物1和产物2分别退火到T1和T2,导致双向延伸和双链,模板和dNTPs或酶耗尽时反应结束

ID NOW最初是为检测流感AB、链球菌A和呼吸道合胞病毒检测于2014年首次推出的先进分子护理平台。目前ID NOW™ COVID-19仅供应美国市场。

#新冠病毒
©2020年09月30日 11:53:32
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